2000年，李佳颖被导演易智言导演发掘并参与了电影《蓝色大门》的演员训练。

2003年，在餐厅工作的李佳颖又被詹仁雄导演引荐给广告公司并正式开始了个人的演艺生涯。

2004年，李佳颖获得了台湾中视综艺节目《我猜我猜我猜猜猜》美少女选拔单元的冠军。

2013年，李佳颖与何以奇、钟承翰合作主演l 都市励志剧《刺猬男孩》，并在剧中饰演了清纯可爱的女主角夏雨静。

2014年，李佳颖与张书豪、贺一航、陈乃荣联袂主演现代家庭温情剧《长不大的爸爸》，并在剧中饰演了个人的首个妈妈角色潘秀慧。

2015年，李佳颖与唐禹哲、简宏霖、王思平合作主演了都市爱情偶像剧《莫非，这就是爱情》，并在剧中饰演了内心保守谨慎却又对爱情充满期待的爱情医生关晓彤。